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时间:2008-1-16 来源:广西壮族自治区水产畜牧兽医局科技与对外合作处 编辑:gxbreed 【字体:大 | 中 | 小】
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DB45/T95-2003
1 范围 本标准规定了种鸡人工授精技术的用具、种公鸡的选择及训练、采精、精液品质检查、精液稀释、输精技术。 适用于广西境内采用人工授精的种鸡。 2 用具 2.1 集精杯 用于收集精液,可用有刻度的试管、离心管等。 2.2 采精杯 用于采精,呈漏斗状,末端封闭。 2.3 保温瓶或保温杯 用于精液保温或短时间贮存。 2.4 温度计 用于测量水温。 2..5 输精器 用于输精,可用有刻度的胶头滴管、25ul~50ul的微量移液器或特制输精枪。 2.6 毛剪 用于剪去公鸡肛门周围的羽毛。 2.7 75%酒精 用于人工采精前对公鸡肛门周围进行消毒。 2.8 消毒锅或者消毒柜 用于授精器具的消毒、烘干。 2.9 其它 显微镜、载玻片、试纸、毛刷等。 2.10 清洗消毒 将集精杯、采精杯、输精器等器具用洗涤剂洗刷污垢,用水冲洗干净,再用蒸馏水冲洗1~2次,然后用沙布包好,放入消毒锅或消毒柜消毒15~30分钟、烘干备用。 3 种公鸡的选择及训练 3.1 选择 公鸡经育成期多次选择后,配种前2~3周对公鸡进行最后一次选择。选留体格健壮、体重达标、冠、肉髯等第二性征明显、腹部柔软,按摩时有肛门外翻,交配器勃起等性反射的公鸡。种公鸡上笼前检鸡白痢病,淘汰阳性者。 3.2训练 受训公鸡单笼饲养3~4周。在训练前,剪除肛门周围2cm左右的羽毛。在配种前2~3周,开始采精训练,将公鸡逐只捉出,反复进行背部按摩,使其建立条件性反射。按摩方法是左手掌向下,贴于公鸡背部,从翼根向背腰部,由轻渐重推至尾羽区,按摩数次,即引起公鸡的性反射。采精宜在相对固定时间进行,每天1次或隔天1次,一旦训练成功,则应在固定时间采精。经3~4次训练,大部分公鸡都能采到精液。经多次训练仍不能建立条件反射的公鸡应淘汰。 4 采精 4.1 采精方法 生产上,常采用按摩采精法。通常由2人操作,1人保定公鸡,1人按摩与收集精液。 4.2 保定公鸡 保定员用双手各握住公鸡1只腿,自然分开,拇指扣其翅,使公鸡头部向前 ,尾部朝向采精者,呈自然交配姿势。 4.3 按摩与收集精液 采精者右手的中指与无名指夹住采精杯,杯口朝外。左手按摩公鸡背侧数次,引起公鸡性反射后,迅速转向尾下方,将尾羽拔向背部,并用拇指与食指跨捏于泄殖腔上缘两侧,同时右手母指和其余4指呈虎口状紧贴于腹部向泄殖腔方向轻轻抖动作同步按摩,当公鸡泄殖腔外翻并露出交配器时,左手拇指与食指作适当压挤,精液即流出,右手离开鸡体,便可用采精杯承接精液。 4.4 采精频率 采用隔日采精制度。若配种任务大,可连采3天停采1天。 4..5 采精量 正常情况下,每只公鸡每次采精量为0.3~0.6ml, 4.6 采精注意事项 采精动作要迅速轻柔,人员相对固定,环境要安静,在公鸡排精时,左手一定要捏紧泄殖腔两侧,待排精完毕后再松开,精液受污染应废弃不用。采到的合格精液置于38~40℃的保温瓶或杯中。20min内用完 5 精液检查 5.1 外观性状检查 正常的鸡精液为乳白色,精液中混有尿酸盐时会出现絮状物,混有粪便时会呈浅黄褐色;精液透明呈水渍状说明精子密度下降,颜色呈现微红色说明泄殖腔粘膜出血并混入精液。 5.2 活力检查 采精后20分钟内进行,方法是取精液和生理盐水各1滴,置于载玻片一端,混均,放上盖玻片。在37℃ 条件下,用200~400倍显微镜检查。以呈直线前进运动的精子数占所有精子数的百分率评定精子活力,占10%的为0.1级 、20%的为0.2级......100%的为1级;等级越高,受精能力越强,圆周运动,摆动的精子均无受精能力。 5..3 密度检查 5.3.1估测法 用一个玻璃棒蘸取或用吸管吸取一滴精液涂于载玻片上,置于400倍显微镜观察。视野内精子的分布可以分为3级-- 密:视野布满精子,精子间无空隙。每毫升精液有精子40亿以上。 中等:视野中精子之间有1个精子的空隙。每毫升精液有精子20~40亿。 稀: 精子间空隙有2个以上,每毫升精液有精子20亿以下。 5.3.2计数法 用红血球计数器计数。检查前在400倍显微镜下找到计数板上的计数室,用红血球吸管吸取精液至0.5刻度处,吸取3%的盐水至101刻度处,用右手拇指和中指分别按住吸管玻璃柱两端翻动几次,使精液与盐水混合均匀。将混合液挤出两滴,再把吸管口放于计数板表面的前部,挤出一滴混合液,让其流入计数板中间的槽内,调整显微镜的微调旋钮,寻找计数室,计数时在方框内选取5个计数室进行精子计数。压在计数室边线上的精子,计数时计头不计尾、计左不计右、计上不计下。5个计数室的精子依次用计数器记录,得出总数,再用以下公式计算精子密度: 精子密度(亿个/ml)=5个方格内精子总数×0.1 6 精液稀释 通常用原精液输精。需稀释,比例以1:1为宜。稀释液常用生理盐水(0.9%的氯化钠溶液)、葡萄糖生理盐水或专用精液稀释液。采精后应尽快稀释,将精液和稀释液分别装于试管中,并同时放入30℃保温瓶或恒温箱中,使两者温度相等或相近。稀释时稀释液应沿装有精液的试管壁缓慢加入,轻轻转动,使均匀混合。加入稀释液后不能急速晃动或用吸管、玻璃棒快速搅动,以免精子的颈部断裂。 7 输精 7.1 时间 一般安排在每天14时~18时进行,夏季可安排在15时~19时。 7.2 输精量 每次输精输入原精液0.025~0.03ml。具有活力的精子数不低于0.7亿个。母鸡接受第一次输精时或产蛋后期的输精量应该加倍。 7.3 深度 从泄殖腔翻开后露出的输卵管开口处起,输入的深度为2~3cm。 7.4 方法 输精时1~2人翻泄殖腔,1人输精。翻腔人员用左手握母鸡的双腿并提起,右手掌置于耻骨下,在腹腔柔软处施以一定的压力,泄殖腔内的输卵管开口便翻出(位于鸡体左侧)。输精员把装有一定量精液的输精器向翻出的输卵管口插入,输入精液,拔出输精器,同时翻腔者松开右手,然后将母鸡放回原处。 7.5 间隔时间 间隔4~5天输精一次。产蛋后期或夏季可3~4天输精一次。
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