摘要：应用精子质量分析仪(SQA)对猪精子的活力、密度和正常形态进行了检测并与常规分析作了比较。通过检测鲜精87个样本活力为0.7942±0.07459，染色死活计数法活力为0.8018±0.01013两者差异不显著(P>0.05)。目测活力为0.8237±0.1640差异显著(P<0.05)。SQA检测密度(N=27)平均为1.788亿/ml±0.3194亿/ml，计数板测定为1.898亿/ml±0.5127亿/ml，精子密度仪测定为1.976亿/ml±0.6745亿/ml。三种检测密度的方法差异均不显著。SQA检测精子正常形态率为51.8125%±4.6172%，抹片染色检查为87.5625%±4.6485%，差异巨大(P<0.001)。此两种方法呈现良好线性相关，相关系数r为0.8256，r非常显著(P<0.01)；得回归方程y=44.49+0.8313x

　　关　键　词：精子质量分析仪；猪精子；活力；密度；正常形态率

　　中图分类号：S828.3+4　文献标识码：B　文章编号：0258-7033(2000)04-0037-03

　　精液常规分析(SFA)在人工授精中具有重要作用。准确、客观地测定精子密度、活力和正常形态是精液稀释、保存和利用的前提，但是以往的仪器无法做到快速和客观。上述项目的检测结果往往因操作者的技术水平和经验而造成较大误差。随着精液贸易的频繁，迫切要求一个客观、快速并具有较高准确性的工具。
 
　　精子质量分析仪(SQA)是以色列的科技人员于90年代开发并取得美国专利，世界卫生组织推荐的智能型电子仪器。由于它体积小(一个笔记本大小)，重量轻(800g)，样本量小(10μl)、准确性高，灵敏性强，重复性好，测定范围广(精子密度500万个/ml～40亿个/ml)、样本不需前处理以及速度快(40秒内可测定活力、密度和正常形态率及活力指数)等优点而深受基层用户的欢迎。Bartov等、Robyn等、邓春华，等，卢文红，等［1～4］应用该仪器对人精子品质的检测进行了应用研究。由于家畜的精子结构和运动特性和人精子有一定差异，在人工授精中能否应用该仪器，仍需研究。本试验是在生产条件下试用SQA情况的报告。

　　1　材料与方法

　　1.1　材料

　　1.1.1　样本来源：1998年9～12月份在广南畜牧有限公司和广州良种猪场共采集并分析精液样本87份，其中大约克公猪精液35份，长白公猪精液27份，杜洛克公猪精液15份。所有公猪均为正在使用的青壮年公猪。所有样本均由相同人员、使用相同仪器、按统一的标准方法检测。

　　1.1.2　仪器：精子质量分析仪(SQA)系从以色列Medical Electnonic Systems Ctd.在华分公司购得。精子密度仪：由美国带回。显微镜：奥林巴斯型普通光学镜；血球计数板，医用(上海)。

　　1.2　检测方法

　　1.2.1　检测项目：活力、密度、正常形态率(1-畸形率)。

　　1.2.2　方法　精液常规(SFA)按王元兴，等［5］方法进行；SQA按议器说明进行，精子密度仪(美国)先将原精按0.3ml样本加入2.9%柠檬酸钠2.7ml混匀；每个样本均分为3份，一一对应用3种方法检测。

　　1.3　统计分析　各组间均数差异显著性用t检验。正常形态率在t测验后，进行相关、回归分析。

　　2　结果

　　2.1　猪精子的活力　表1列出了3种检测方法所得精子活力的结果。从表1可以看出SQA与目测法之间差异显著(P<0.05)，而和伊红一苯胺黑活体染色法差异不显著(P>0.05)。

　　表1　精子活力测定结果

项目 SQA 目测 活体染色法
样本数 87 87 87
平均数 0.7942 0.8237 0.8018
标准差 0.07459 0.1640 0.1013

　　2.2　精子密度的测定　应用SQA、精子密度仪和血球计数板3种方法测定密度的结果如表2。

　　表2　鲜精密度测定结果
 
项目 SQA 密度仪 血球计数板
样本数 27 27 27
平均数(亿/ml) 1.788 1.976 1.898
标准差(亿/ml) 0.3194 0.6745 0.5127

　　统计分析表明3种方法之间差异均不显著(P>0.05)，但是以SQA变异最小。

　　2.3　正常形态率的测定　用SQA测定87个样本的正常形态率为50.464%±3.916%。按常识这一结果明显低于动物繁殖学和畜牧生产实践的指标。为此再取41个样本均分为二，每个样本均用SQA和抹片染色计数畸形精子(每片观察200个精子)其结果列于表3。

　　表3　正常形态率测定结果

SQA 抹片染色检查
样本数 41 41
平均数(%) 51.8125 87.5625
标准差 4.6172 4.6485

　　由于两种方法测得正常形态率差异十分显著(P<0.0001)，再一一对应测定，经相关分析为线性正相关，r为0.8256；检查r非常显著(P<0.01)，回归分析得方程：=44.49+0.8313x。

　　3　讨论

　　精液质量分析是动物繁殖中最基本的检查项目之一，也是人工授精中关键的检查手段。传统的精液分析方法只是应用显微镜观察精子活力、密度和畸形率等指标，其结果往往因检测人员不同而存在差别，缺乏客观性。精子质量分析仪可直接在仪器上显示精子活力、密度和正常形态率，并且还有精液质量的综合指标SMI。精子密度、活力和正常形态精子百分率等参数与公猪生殖力关系极其密切，精子质量分析仪正是针对这三项参数设计的，并且测定时间快速，使得精液质量评价变成简便快捷。

　　本研究的结果表明，应用精子质量分析仪测得活力与活体染色法的活率无显著差异(P>0.05)，而且测定样本间的标准差较小，比目测法更精确和客观。

　　应用SQA测定密度和应用进口美国密度仪和血球计数板法差异均不显著，但变异较小。应用SQA测定精子正常形态率与拌片染色检查相差绝对数为35.75个百分点，相差69.0%。这可能是WHO关于人类精子正常形态率和动物繁殖中规定的正常形态率(一般用畸形率表示)的要求不同而致。但是用SQA和染色计数测定正常形态率有很好的线性相关，相关系数为0.8256。据本试验拟合的回归方程式=44.49+0.8313x，据此公式计算或绘制图表可立即查出动物繁殖中规定的正常形态率或畸形率。

　　关于SQA上显示的精液品质综合指标(SMI)；因在动物繁殖尚缺此项指标，不能直接套用。在人类精液品质综合指标(SMI)活力指数<80为不良精液，80～160为中等精液，SMI>160为优良精液。在我们测定的87个样本中有83个样本的SMI>160即96%为优良精液。关于猪精液品质综合指标(SMI)如何拟定，有无拟定的必要，在生产实践怎样使用SMI值等问题，有待进一步深入研究。

王前（广州伯瑞丁动物新技术开发有限公司　510405）
王余平（广州广南畜牧有限公司，　510555）

参考文献：

［1］　Bartoov B,Sneider M,Ben-Barak J,et al.［J］.Fertil steril,1991,56:108～112.
［2］　Rohyn C,Gazy N,Lin Dy,et al.［J］.Fenil,1995,63:1071～1076.
［3］　邓春华，胡瑞嫦.［J］.中山医科大学学报，1998，(2)：143～143.
［4］　卢文红，梁小薇，等.［J］.中国生殖生育杂志，1998，(1)：96～98.
［5］　王元兴，郎介金.动物繁殖［M］.南京：江苏科学技术出版社，1993.327～331