1.饲料蛋白质对水产动物免疫机能的影响
蛋白质与鱼虾机体免疫水平有密切关系。蛋白质是鱼虾生命生存的重要物质,是构成机体的细胞。组织、器官的营养物质。鱼类正常生长需要饲料中有数量足够、容易消化吸收、而且各种氨基酸配比适宜的蛋白质。鱼类摄取蛋白质不足时,生长缓慢,机体免疫力下降,组织更新缓慢,创伤愈合力差,易患病。蛋白质过多,消化不了而排出体外,降低蛋白质的消化率,也易引起肠道疾病。 研究表明,蛋白质水平和必需氨基酸指数(EAAI)对异育银鲫免疫力有显著的影响,蛋白质水平在28%左右时,异育银鲫免疫力最强;蛋白质水平进一步提高至28%以上时,虽然仍保持较高的相对生长率,但免疫力和蛋白质效率显著下降;蛋白质水平太低不仅导致生长速度太慢,也使鱼体免疫力下降。在相对适宜的蛋白质水平条件下,氨基酸全面平衡不仅使鱼获得较快的生长速度,而且免疫力也有所增强。
2.饲料脂肪对水产动物免疫机能的影响
饲料中脂肪尤其是必需脂肪酸是恒温动物免疫反应的重要调节因子。日粮中添加必需脂肪酸可以提高动物机体的体液免疫和细胞免疫,可以增强细胞因子的产生以及对有丝分裂原刺激的淋巴细胞增殖反应产生影响,而且可以增强巨噬细胞的吞噬能力。同样Blazer(1991)报道,含有不同油脂的饲料,可影响斑点叉尾(鱼回)巨噬细胞的杀菌活性,而且杀菌活性与饲料中长链高度不饱和脂肪酸含量呈正相关任泽林等(2000)在半纯化饲料中分别加入3%新鲜鱼油(POV1.28meq/kg)和POV分别为59.28、118.79和189.37 meq/kg的氧化鱼油,投喂体重100g 左右2龄鲤鱼种,结果表明,氧化鱼油可导致鲤白细胞各噬活性增强,说明鲤鱼非特异性的细胞免疫应答水平提高。巨噬细胞集合体(Macrophage aggregates,Mass)是色素巨噬细胞的主要聚集场所,主要存在于鱼的脾脏、肾脏以及肝脏。它对于水产动物体液免疫和细胞免疫具有重要的调节作用,同时还可以清除体内或体外的有毒有害物质。 Montero等(1999)报道,多不饱和脂肪酸可以增加幼年乌颊鱼类脾脏的巨噬细胞聚合体,从而影响其免疫机能,但其作用机理目前尚不清楚。
3.饲料维生素对水产动物免疫机能的影响
3.l维生素C(VC) VC是动物生长和维持正常生理机能所必需的营养物质,大多数鸟类和哺乳动物能利用葡萄糖醛酸合成VC,但许多水产动物则不能合成,必须从食物中获得。VC对水产动物的体液免疫和非特异性细胞免疫均具有一定的影响,因而在水产动物饵料中添加VC能够增强其免疫功能,提高抗病能力和存活率。如在中国对虾饵料中添加VC,能明显降低其受副溶血弧菌感染的死亡率,并提高其耐缺氧能力,延长存活时间及提高存活率(王伟庆等,1996)。 但目前关于VC对水产动物免疫功能的影响及作用机制处于研究和探索的阶段。Schmidt(1997)报道, VC是动物正常免疫机能所必需的,但它并不是直接起作用,而是与一些抗氧化物质如VE和对机体有防御机能的金属元素铁、铜等的运输有协同作用。 Verlhac( 1998)等发现高VC(3000mg/kg)含量的饵料能显著提高虹鳟的溶菌酶活性。国外有关VC 与鱼类免疫机制间关系的研究表明,在饵料中添加VC能够明显影响鱼类补体的抗体依赖性溶血活动。 Haride等(1991)对大西洋鲑Salmo salar的研究也有类似的结果,大西洋鲑血清补体的溶血活性随饵料VC含量的增加而明显地增高。Ortuno(1999)等用高VC的饵料投喂金头鲷,其呼吸爆炸作用与血清补体活力均呈现显著提高。我国学者在青石斑动物营养与免疫鱼的试验中也证实了上述结果。秦启伟等(2000)在冰冻饵料小杂鱼中添加不同剂量的VC(每公斤饵料鱼含量分别为 0,500,1000,1500和 2000 mg),连续投喂青石斑鱼 Epinephelus awara20周后,发现其血清补体经典型溶解SRBC的能力随饵料VC添加量的提高而显著增强(P<0.01),与只投喂冰冻小杂鱼的对照组相比,添加量为2000 mg/kg组鱼的溶血活性提高1倍多,但VC对血清的杀菌活性却没有作用。VC对补体活性的影响可能与C1 的合成有关。当VC是正常生长需求量的100信时,能显著提高血浆Clq的含量,而Clq是C1的一个组成成分,C1是激活经典补体途径的第一个补体成分。对经典补体途径的激活可能需要高剂量的VC,并需要长时间的添加(Velhac等,1996)。
3.2维生素E(VE) VE也是水产动物重要的营养物质,其主要功能为抗氧化,保护脂溶性细胞膜和不饱和脂肪酸不被氧化,饲料中适量添加,可以作为免疫增强物质,加强吞噬作用,强化吞噬细胞的生成。 Hardie等(1990)认为,不添加VE组的大西洋娃鱼补体活力受到损害,死亡率显著高于添加组,巨噬细胞吞噬细菌的能力下降。随着饲料中VE水平的升高。虹群红细胞对氢过氧化氢诱导溶血的抗性增强,红细胞膜的稳定性亦增加;VE和其他细胞抗氧化剂的需要依赖于内源性和外源性游离自由基的产生以及细胞膜中可氧化脂肪的浓度,饲料中补充VE促进巨噬细胞的吞噬活力,增强虹蹲对细菌病原体的免疫力wise等,1993)。饲料中添加VE可以提高虹群鱼抗Y.ruckeri抗体的产生,以及大比目鱼巨噬细胞的活性(Pulsford,1995),但是不能影响大西洋鲑鱼的体液抗体免疫反应,对免疫刺激和肾脏细菌性疾病无抵抗作用。Clerton(2001)等以合适量VE的饲料投喂虹鳟,可增强吞噬细胞的噬菌作用。适量补充VE还能显著增强中国对虾血清中酚氧化酶(PO)活力,提高对副溶血弧菌与溶藻弧菌的吞噬活力。
3.3维生素A 维生素A对维持水产动物免疫系统正常功能是必需的。最近研究表明,大西洋娃鱼和虹群摄入VA能影响体液和细胞免疫功能。用缺乏VA的饲料饲喂虹鳟和大西洋娃,鱼血清抗蛋白酶活力、肾脏白细胞游走活力和巨噬细胞吞噬能力降低。鱼类的抗蛋白酶在中和细菌病原体产生的胞外蛋白酶方面起着重要作用,尤其是a2一巨球蛋白具有保护鲑科鱼类免受A.Salmonicida细菌感染能力。饲料中高水平的VA能提高鱼体淋巴细胞吞噬能力和血清溶菌酶及特异性补体活力,从而对水产动物免疫功能产生影响。
4.矿物质对水产动物免疫功能的影响
矿物如铁、硒、铜、锌在恒温动物的抗病力和免疫反应上相当重要。然而矿物质对鱼类抗病力的研究相当少,铁能增强河道鲶对致病菌的抵抗力。硒可强化大西洋娃超氧化物歧化酶(SOD)活力和抗病力,硒能提高河道鲶的谷胱甘肽过氧化物酶的活性和抗病力。Lim等(1997)在研究投喂缺铁和补充铁饵料的斑点叉尾(鱼回)对叉尾(鱼回)爱德华氏菌感染的反应时发现,投喂缺铁饲料的鱼对爱德华氏菌体外抗原腹膜巨噬细胞的趋化反应受到抑制,但在投喂补充铁饲料的鱼中,这种异常情况被扭转过来,然而感染试验结果表明,饲料铁不能保护斑点叉尾(鱼回)避免受叉尾(鱼回)爱德华氏菌感染而引起的死亡。但是,投喂缺铁饲料的鱼,死亡出现时间较早。Lim等(2000)在河道鲶饲料中添加不同剂量的蛋氨酸铁(0,30和300mg/kg),结果表明,铁缺乏组日粮中总细胞数目、红血球细胞数量以及血色素明显的降低,并且在缺铁组日粮中添加高剂量的VC反而使血色素更加明显的降低;在外抗原爱德华氏菌刺激下,添加铁的日粮组河道鲶巨噬细胞移植明显增强。Berger等(1996)报道,铁过量或者是缺乏对水产动物机体免疫系统都会产生影响,但Sealey等(1997)报道,缺铁日粮对特异性抗体反应没有影响。而饲料中其他矿物质(Mg、Mn、Zn、Co、Cu)含量较低但增加碘和氟的含量也可以显著降低鱼对细菌肾病(BKD)的感染。 综上所述,饲料>组成不仅能影响动物的营养,而且会影响动物的免疫、抗病能力。但是目前关于水产动物营养与免疫因子之间相互作用的关系,以及作用机理尚不是十分清楚,因此必须加强研究水生动物体内的免疫因子和营养物质的转移、吸收、利用、代谢的相互关系,为水产养殖提供有力的理论依据,促进水产业的发展。
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